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本制品是基于磁珠法的红细胞残留DNA（rbcDNA）纯化试剂盒。尽管一般认为成熟红细胞并不具有细胞核，但其内仍然有着残留的DNA，如红细胞在脱核后胞内还存在微核（MN）。微核是一种在细胞分裂过程中错误产生的核外染色质片段，被视为基因组不稳定的标志。研究发现微核频率增加与癌症、自身免疫性疾病、神经退行性疾病和心血管疾病有关，微核也会导致非整倍体和异常基因表达，可能会驱动癌症的发生。红细胞的微核可自发产生，也可来自外部应激诱导。因此研究rbcDNA对癌症的早期预防具有重要意义，为此本公司开发了基于DNA高结合力磁珠的纯化方式提取rbcDNA的试剂盒。

• 适用于血清和血浆样本。
  
• 安全无毒，不需要使用苯酚和氯仿等有机溶液。
  
• 操作简单，不需要额外在磁珠洗涤液中补加乙醇。
  
• 可在50μL～100μL范围内灵活调节洗脱体积浓缩rbcDNA。
  
• 得到的rbcDNA与PCR、荧光PCR和LAMP等核酸扩增兼容。
  
• 与市场上大多数基于磁珠法的自动核酸纯化仪兼容。
  
• 足够100次红细胞残留DNA提取纯化实验，每次可处理720μL血浆。
  
• 本制品只能用于科研。

• 试剂分装：按下表将各种试剂装在96孔板对应的孔中。
  

  孔位	试剂名称和体积
  第3/9列孔	700μL通用磁珠洗涤液1
  第4/10列孔	700μL通用磁珠洗涤液2
  第5/11列孔	700μL通用磁珠洗涤液2
  第6/12列孔	55μL DNA洗脱液

  
  
• 样品孔的准备：按下表把血浆样本、通用裂解液A型、rbcDNA-磁珠结合液、rbcDNA专用磁珠分装在96孔板的低1/7列孔和第2/8列孔中。
  

  孔位	试剂名称和体积
  第1/7列孔	血浆样本：360μL 通用裂解液A型：480μL rbcDNA-磁珠结合液：120μL rbcDNA专用磁珠：20μL
  第2/8列孔	血浆样本：360μL 通用裂解液A型：480μL rbcDNA-磁珠结合液：120μL rbcDNA专用磁珠：20μL

  通用裂解液A型在4℃放置后可能会产生结晶，使用前必须放在65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用。
  
  
• 打开核酸提取仪，按下表设置程序。
  

  孔位	名称	等待时间 （min）	混合时间 （min）	吸磁次数	容积 （μL）	混合速度	温度
  1	结合1	0	10	1	960	中	关闭
  2	结合2	0	10	1	960	中	关闭
  3	洗涤1	0	1	1	700	中	关闭
  4	洗涤2	0	1	1	700	中	关闭
  5	洗涤2	0	1	1	700	中	关闭
  6	洗脱	4	5	1	55	中	关闭
  4	去磁	0	1	0	700	快	关闭

  
  
• 将装好试剂及样本的96孔板放到核酸提取仪中，把磁力套插到仪器中，运行程序。
  
• 提取结束后，在核酸提取板的第6列孔把DNA转移至1.5mL离心管中，DNA样品可以直接用于PCR，也可放-20℃长期保存。